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多肽固相合成常用的樹脂及切割方法
作者:固拓多肽合成公司    發(fā)布于:2022年08月30日
摘要:固相多肽合成如今用到的主要有兩種方式:BOC和FMOC。BOC方法合成過程中,必須頻繁使用TFA脫BOC,并且在之后的從樹脂上切割下去需要使用HF;FMOC方法反應(yīng)條件平穩(wěn),在通常的實驗環(huán)境下就能直接合成。以下是固相合成的常見概

固相多肽合成如今用到的主要有兩種方式:BOCFMOC。BOC方法合成過程中,必須頻繁使用TFABOC,并且在之后的從樹脂上切割下去需要使用HF;FMOC方法反應(yīng)條件平穩(wěn),在通常的實驗環(huán)境下就能直接合成。以下是固相合成的常見概念。

固相合成比較常見的樹脂

在固相合成中,樹脂的材料一般是聚苯乙烯-二乙烯苯,尺寸為75-150μm,交聯(lián)度為1-2%,目前所使用的交聯(lián)度大部分為1%,因為在這樣的交聯(lián)度下,在DMF,DCM中,樹脂有著良好的溶脹特性,自身在立體上成了一個空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),在樹脂組織結(jié)構(gòu)反應(yīng)物分子可以自由自在的移動。

連接手腕一邊用作反應(yīng)位點,一邊接入在樹脂上,此為樹脂中最重要的部分。2-Cl-Trt,Rink-Amide-MBHA,PAM,MBHAWang等都為當下普遍使用的樹脂。當中,在BOC策略中使用PAM,MBHA,因為他們對酸的穩(wěn)定性比較高,只能在在HFTFMSA等強酸性環(huán)境下,才能成功把它們切割下來。

多肽固相合成常用的樹脂及切割方法

固相合成切割方法

結(jié)束固相合成之后,如果想要從樹脂上把多肽切割下去,就需要選擇合適的切割試劑,然后用冰乙醚沉淀,離心將沉淀采集,經(jīng)過HPLC分離純化,冷凍干燥以此獲得產(chǎn)品。

氨基酸序列會由于使用的樹脂不同而不同,所以在切割的時候,也要采用截然不同的切割方法。大多數(shù)選擇的切割環(huán)境為酸性環(huán)境。一般采用HF切割PAM,MBHA樹脂,在切割的時候需要將苯甲醚,對巰基苯酚,對甲苯酚等試劑加入其中。一般采用TFA切割WangRink-Amide,Trt樹脂,在切割過程中將三異丙基硅烷,苯酚,乙二硫醇,苯甲硫醚,水等加入。這種增添試劑關(guān)鍵用作碳正離子俘獲試劑使用,從而對切割反應(yīng)過程中產(chǎn)生的碳正離子展開俘獲為目的,進而使這樣的碳正離子對一些氨基酸側(cè)鏈的攻擊造成的不良反應(yīng)能夠減少。Trp,Tyr為相對易造成副反應(yīng)的氨基酸,反應(yīng)通常,是在常溫環(huán)境下2h-4h,TFA/TIS/EDT/H2O94/1/2.5/2.5),HF/p-cresol/p-thiocresol90/5/5)為比較常見的切割配比,10-15ml/g樹脂為常規(guī)的切割試劑使用量。

寫到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSAKLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。

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