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當(dāng)下在多肽試劑,多肽抗體與多肽生物學(xué)的研究中,許多的多肽標(biāo)記及修飾的內(nèi)容得到了多方面的使用。較為常見的多肽標(biāo)記及修飾的內(nèi)容有磷酸化修飾,生物素標(biāo)記,熒光標(biāo)記(FAM,FITC)及非放射性核素標(biāo)記(C13,H2)等。
多肽標(biāo)記及修飾
磷酸肽合成
磷酸肽在生命過程中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用,在多肽上磷酸化的地方在Ser,Thr,Tyr?,F(xiàn)在進(jìn)行磷酸肽合成時(shí)往往采用磷酸化氨基酸,一般使用單芐基磷酸化氨基酸,Tyr也可以直接對(duì)磷酸化氨基酸進(jìn)行使用。然后用HBTU/HOBt/DIEA辦法連接磷酸化氨基酸??墒窃撧k法在多磷酸化多肽或長肽的合成時(shí)也有弊端,基于連接效率較低,獲得的產(chǎn)品純度也比較低。
合成這種磷酸化多肽采用后磷酸化方法。在多肽合成完成后,將要標(biāo)記的氨基酸的側(cè)鏈保護(hù)基選擇性地脫去。對(duì)于Tyr,Thr,反應(yīng)能夠直接使用側(cè)鏈不保護(hù)的氨基酸。
非放射性核素標(biāo)記
在非放射性核素標(biāo)記中,鑒于C13,H2放射性小,安全度高,得到了普遍的運(yùn)用。按照常規(guī)的多肽合成辦法,較為完全的非放射性標(biāo)記的氨基酸能夠在多肽上直接連接標(biāo)記好的氨基酸。
熒光標(biāo)記
熒光標(biāo)記普遍使用于生物學(xué)研究關(guān)鍵因?yàn)槠錄]有放射性且操作簡便。熒光標(biāo)記辦法和熒光試劑的構(gòu)造相關(guān)聯(lián),與接肽反應(yīng)使用的方法相同,有游離羧基的采用HBTU/HOBt/DIEA辦法連接。不過為了防止在切割的過程中被TFA切割掉,必須在連接FITC前,添加一個(gè)氨基己酸。
寫到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。
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