混合酸酐法是多肽合成縮合方法中最難最有效的方法之一，無機(jī)酸、有機(jī)酸都可用于形成混合酸酐，通常情況下，獲得廣泛使用的寥寥無幾，譬如氯甲酸烷基酯，如今主要換成了氯甲酸異丁酯。

氯甲酸酯和羧基組分通過反應(yīng)形成酸酐，兩者的羰基相互競爭，氨解反應(yīng)因?yàn)槠?/span>親電性和（或）空間位阻有了可供選擇的區(qū)域。親核試劑胺對氨基酸組分的羧基進(jìn)行進(jìn)攻可以在由氯甲酸烷基酯以及N保護(hù)的氨基酸羧酸鹽形成混合酸酐時，使預(yù)期的肽衍生物形成，同時釋放出游離酸形式的活性成分。在應(yīng)用氯甲酸烷基酯時，不穩(wěn)定的游離的單烷基碳酸，會立即分解形成相應(yīng)的醇和二氧化碳。

混合酸酐主要通過二氯甲烷、四氫呋喃、二氧六環(huán)、乙腈、乙酸乙酯或DMF中分別溶解N保護(hù)的氨基酸或肽使用等當(dāng)量的三級堿處理而形成。然后在－15℃-5℃溫度下，劇烈攪拌，同時將氯甲酸烷基酯加入才能保證不對稱酸酐（活化）形成。再將親核性氨基酸組分在短暫的活化之后加入。如果想很容易地進(jìn)行混合酸酐法，就要嚴(yán)格遵守上述的反應(yīng)條件。

有些專家對于混合酸酐的穩(wěn)定性，副產(chǎn)物氨基甲酸酯和消旋等方面的減少進(jìn)行了深入研究，通過這一研究進(jìn)一步的了解反應(yīng)機(jī)理，并且提高了該方法的縮合效率。到目前為止，該方法得到了非常廣泛的應(yīng)用。通過研究產(chǎn)生過量氨基甲酸酯的原因，特別是在異亮氨酰基和纈氨?；那闆r下，如果三及堿使用N－甲基哌啶以及溶劑使用二氯甲烷，那么就可以使主要副反應(yīng)得以避免。混合酸酐水解的穩(wěn)定性比較高，所以水洗滌有機(jī)相可以使混合酸酐純化。

在混合酸酐縮合法的實(shí)際應(yīng)用中，需要注意以下幾個方面：

盡管對于混合酸酐的形成和隨后的縮合反應(yīng)，含水的DMF可以算作一個好的溶劑，然而相比于使用四氫呋喃或鹵化試劑為溶劑，它對于消旋的促進(jìn)作用要高得多。

寫到最后:

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